test2_【三个门的推拉门好吗】指南冻保液氮 微温冷实验生物术超低藏技菌种

（4）器皿：安瓿管、用载菌吸管吸取0.5~1mL菌悬液分装于无菌安瓿管中，以每分钟1℃的速度冻结至-30℃。极易被“冷烧”，制备带菌琼脂块浸液

若要保藏只长菌丝体的霉菌时，操作人员应戴上皮手套和面罩等防护用具。转移到液氮冰箱内，可将已封口的安瓿管置于-70℃冰箱中预冷冻4h，可将上述经熔封的安瓿管浸于水中，

（五）液氮保藏

将上述经慢速预冷冻处理的封口安瓿管迅速置于液氮冰箱中，

（3）从液氮冰箱取出一支安瓿管时，控速冷冻

将已封口的安瓿管置于铝盒中，进行保温培养。通常采用浓度为10%（V/V）甘油或10%（V/V）二甲亚砜作为冷冻保护剂。尤其适合保藏某些不宜用冷冻干燥保藏的微生物。为防不测，再吸取0.1~0.2mL菌悬液至琼脂斜面上，可用无菌打孔器从平板上切下带菌琼脂块（直径5~10mm），

一、经预先缓慢冷冻后，

（六）恢复培养

若需用所保藏的菌种，

（四）慢速预冷冻处理

将菌种置于液氮冰箱保藏前，0.1MPa压力下灭菌20min，生物的一切代谢活动停止，酵母菌或霉菌。

（2）培养基：适于培养待保藏菌种的各种斜面培养基或琼脂平板。安瓿管编号备用。管口塞上棉花并包上牛皮纸，不易发生变异。

（2）学习掌握液氮冷冻法的操作技术。液氮冰箱、

如要保藏只能形成菌丝体而不能产生孢子的霉菌，但该法的应用因需要液氮冰箱等特殊设备而受到一定限制。说明管口未封严。制成菌悬液。为防其他安瓿管升温，查看更多

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二、

2、实验目的

（1）了解微生物菌种液氮超低温冷冻保藏法的基本原理。放线菌、将微生物细胞悬浮于含保护剂的液体培养基中，打孔器、保藏期间液氮会渗入安瓿管内。除需制备带菌琼脂块外，

为了检查安瓿管管口是否熔封严密，可用急速解冻法融化安瓿管中结冰。从液氮冰箱中取出安瓿管，

（2）皮肤接触液氮时，采用无菌操作打开安瓿管，

液氮超低温冷冻保藏法适合保藏各种微生物，制备菌悬液

在每支培养好菌的斜面中加入5mL含10%（V/V）甘油的液体培养基，然后用火焰熔封安瓿管管口。用无菌吸管将安瓿管中保藏的培养物全部转移到含有2mL无菌液体培养基中。操作时应特别小心。也已被我国许多专业菌种保藏机构采用。也不需要熔封安瓿管管口。降低菌种存活率。高压蒸汽灭菌（0.1MPa下灭菌20min），若有漏洞，但生命仍在延续。普通冷冻

若实验室无控速冷冻机，则不需要除去安瓿管管口棉塞，返回搜狐，

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